畜禽用藥物靶動物安全性試驗指導(dǎo)原則

一、概述

（一）目的

靶動物安全性試驗的目的是了解畜禽對受試藥物推薦劑量、多倍劑量和延長用藥時間使用時的臨床反應(yīng)、組織病理學(xué)和生理生化指標(biāo)變化的特征；從而為明確受試藥物的不良反應(yīng)和臨床應(yīng)用時的注意事項提供依據(jù)。

（二）適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于申報用國內(nèi)外已上市的原料藥研發(fā)的畜禽用藥物新制劑或增加靶動物的已上市制劑等。對局部應(yīng)用的藥物通常不要求進(jìn)行靶動物安全性試驗，但供全身皮膚用藥、可能引起全身吸收作用的藥物以及通過局部用藥發(fā)揮全身作用的藥物則應(yīng)進(jìn)行靶動物安全性試驗。對于含全新創(chuàng)制的原料藥制成的制劑進(jìn)行的靶動物安全性試驗應(yīng)參照VICH的《獸藥靶動物安全性指導(dǎo)原則》（VICH GL43 Guideline on target animal safety for veterinary pharmaceutical products）進(jìn)行。

該指導(dǎo)原則旨在為獲得與靶動物安全性評價有關(guān)的必要信息而提供一般性指導(dǎo)（說明）。特提出進(jìn)行合理解釋。

二、基本原則

1．靶動物安全性試驗應(yīng)根據(jù)養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實際開展，以保證評價結(jié)果的科學(xué)性、客觀性。

2．靶動物安全性試驗原則上應(yīng)對受試藥物所適用的每種靶動物分別進(jìn)行。

3．靶動物安全性試驗應(yīng)在符合獸藥GCP條件下進(jìn)行。

4．靶動物安全性試驗的設(shè)計應(yīng)充分考慮實驗動物毒理學(xué)研究的結(jié)果。

三、試驗設(shè)計

（一）試驗動物

1．品種

靶動物安全性試驗一般選擇受試藥物擬用的健康且具有代表性的動物種屬和類別。

2．試驗階段

應(yīng)根據(jù)藥物的推薦使用階段慎重選擇動物的年齡。如果該制劑預(yù)期用于幼齡未成熟動物，則靶動物安全性試驗中的動物通常選用擬申請產(chǎn)品適用的最低年齡；否則，應(yīng)使用成熟健康動物。畜禽靶動物安全性試驗階段可參考下表。

畜禽靶動物安全性試驗階段選擇參考表

3．來源

應(yīng)從有試驗動物資質(zhì)證明的飼養(yǎng)單位購買，如果沒有資質(zhì)證明的動物，應(yīng)來源清楚，并經(jīng)檢疫合格后才能用于試驗。

4．飼養(yǎng)環(huán)境

動物應(yīng)在試驗環(huán)境下進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)后再開展試驗。飼養(yǎng)環(huán)境不應(yīng)對試驗結(jié)果造成影響。處理組和對照組的動物應(yīng)進(jìn)行相同飼養(yǎng)管理，試驗動物在試驗前通常應(yīng)有1周或更長的時間適應(yīng)新環(huán)境。并且在試驗基線期之前完成預(yù)防性治療（如免疫和驅(qū)蟲等）。試驗期間不能同時使用其他獸藥。

（二）受試藥物

受試藥物應(yīng)與擬上市的制劑完全一致，有完整的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有符合乎規(guī)定格式的說明書。受試藥物應(yīng)來源于同一批號，由申報單位自行研制并在符合GMP條件下的車間生產(chǎn)，并提供中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或其他獸藥檢驗機(jī)構(gòu)出具的產(chǎn)品檢驗合格報告。

（三）動物分組與劑量設(shè)計

1．劑量與分組

一般設(shè)置4個試驗組：空白對照組、推薦劑量組、中間劑量組（高于推薦劑量）和估計的藥物中毒劑量組。一般選擇最大推薦劑量的倍數(shù)，分別為1、3、5倍劑量組，另設(shè)空白對照組。毒性強(qiáng)的藥物可以根據(jù)具體情況設(shè)計1、2、3倍最大推薦劑量試驗組。對安全范圍較窄的藥物，還可按1、1.5和2倍的最大推薦劑量進(jìn)行試驗。

2．動物數(shù)

靶動物安全性試驗通常包括相對少量的試驗單元，每個試驗組大動物（如牛）、繁殖母豬等不少于4頭，中動物（育肥豬、羊等）不少于6頭，小動物（雞、鴨、鵝、家兔等）不少于8只。除非產(chǎn)品預(yù)期僅用于一種性別，原則上每個劑量組應(yīng)包含雄性和雌性動物各半。

（四）給藥方案

1．給藥途徑與方法

按標(biāo)簽說明書中推薦的給藥途徑和方法給藥。

2．給藥周期

按照受試藥物擬在臨床推薦的給藥周期制訂給藥方案，對于只給藥一天的制劑，應(yīng)至少連續(xù)給藥3天；對短期用藥（2天及以上）的制劑，試驗持續(xù)用藥至推薦用藥時間的2倍，但一般不超過15天；對于推薦長期應(yīng)用（15天或更長）的藥物，必須持續(xù)至推薦的最長時間。

（五）試驗周期

每個靶動物安全性試驗都要進(jìn)行一個完整的試驗周期，試驗周期包括實驗環(huán)境適應(yīng)期、給藥周期和停藥后觀察期。一般情況下環(huán)境適應(yīng)期為一周，給藥周期按給藥方案進(jìn)行，停藥后觀察期一般不能少于7天；用于繁殖動物藥物的靶動物安全性試驗周期應(yīng)為一個繁殖周期。

（六）觀察指標(biāo)

1．臨床觀察

試驗周期內(nèi)應(yīng)每天觀察試驗動物采食和飲水情況、臨床表現(xiàn)（如體溫、呼吸、行為、精神狀況等）、生長性能以及相關(guān)動物產(chǎn)品的產(chǎn)量等；應(yīng)詳細(xì)觀察和記錄不良反應(yīng)；擬長期使用的藥物還應(yīng)記錄給藥前和給藥結(jié)束時動物體重和飼料消耗量。

對試驗中出現(xiàn)死亡的動物應(yīng)進(jìn)行尸檢，如果可能，最好進(jìn)行組織學(xué)分析，并盡可能明確病因。

2．血液學(xué)檢查

給藥前和給藥結(jié)束時，每個動物分別采集血樣進(jìn)行血液常規(guī)、血液生理生化指標(biāo)及其他與受試物相關(guān)的生理參數(shù)的檢測。必要時在用藥中期增加血液學(xué)檢查。

3．病理學(xué)檢查

（1）尸體解剖學(xué)檢查

在試驗期間出現(xiàn)與藥物有關(guān)的臨床癥狀或生理生化指標(biāo)明顯異常的動物均應(yīng)屠宰并進(jìn)行尸體解剖學(xué)檢查；如果未見異常的試驗，只對最高劑量組和空白對照組全部動物進(jìn)行剖檢（用于繁殖母畜的藥物除外），分別在給藥結(jié)束時和試驗結(jié)束時各屠宰50%的動物，詳細(xì)檢查心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、胃、十二指腸、回腸、直腸、淋巴結(jié)、腦、骨髓等器官有無異常。

（2）組織病理學(xué)檢查

尸體解剖學(xué)檢查時出現(xiàn)異常的器官均應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查；如果各器官未見異常時，取高劑量組和空白對照組的心、肝、脾、肺、腎等器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

4．其他特異性觀測指標(biāo)

根據(jù)受試藥物的作用特點和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)（如：對在繁殖母畜上使用的藥物，應(yīng)考察受孕情況、產(chǎn)活仔數(shù)和哺乳成活數(shù)等；對在泌乳母畜上使用的藥物，則應(yīng)考察斷奶仔畜的體重和斷奶成活率等；對具有免疫調(diào)節(jié)作用的藥物，則應(yīng)增加免疫學(xué)觀察指標(biāo)等）。

（七）數(shù)據(jù)記錄與結(jié)果分析

1．在試驗實施過程中，試驗方案所涉及的內(nèi)容均應(yīng)逐一記錄。數(shù)據(jù)記錄應(yīng)真實、準(zhǔn)確、完整、規(guī)范、清晰，并妥善保管。數(shù)據(jù)的有效位數(shù)以所用儀器的精度為準(zhǔn)，采用國家法定計量單位和國家推薦使用的單位。

2．統(tǒng)計分析

選擇合適的統(tǒng)計分析程序，對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。比較試驗組與對照組間各項指標(biāo)（如血液學(xué)和血液生理生化等）的顯著性差異，分析藥物不良反應(yīng)產(chǎn)生的原因，并提出注意事項。

四、試驗報告

為公正、科學(xué)地評價藥物對靶動物的安全性，對試驗報告做如下要求：

（一）試驗報告應(yīng)提供試驗獲取的所有數(shù)據(jù)，包括所有試驗動物。未納入統(tǒng)計分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價的情況也應(yīng)報告，并說明在各組別中的分布情況。

（二）每個靶動物安全性試驗必須單獨形成最終報告，報告應(yīng)符合GLP和GCP的質(zhì)量管理要求。